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标题: 辅助生殖领域的卵母细胞、胚胎和囊胚冷冻保存技术全揭秘! [打印本页]

作者: 退路    时间: 2017-6-6 19:33
标题: 辅助生殖领域的卵母细胞、胚胎和囊胚冷冻保存技术全揭秘!

  研究背景

  对卵母细胞及胚胎的成功冷冻保存在辅助生殖中十分重要,不仅能最大限度地提高IVF周期中卵巢刺激的安全性和有效性,而且能促进生育力保留。目前临床上通常采用两种冷冻方法:慢速冷冻或玻璃化冷冻。慢速冷冻的冷冻过程足够缓慢,使细胞脱水充分,同时最大限度地减少细胞内冰的形成,而玻璃化冷冻技术则使细胞和细胞外环境凝固成玻璃状态,不形成冰晶。

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  研究目标

  通过对卵母细胞及胚胎采用慢速冷冻/解冻和玻璃化冷冻/复苏技术后的临床结局进行系统性回顾和荟萃分析,评价最有效的超低温保存方法并作为WHO指导的证据支持。

  检索方法

  对Medline数据库1996年至2016年8月1日信息内容进行检索,检索条件为:(Oocyte(s) [tiab] OR (Pronuclear[tiab] OREmbryo[tiab] OR Blastocyst[tiab]) AND (vitrification[tiab] OR freezing[tiab] ORfreeze[tiab]) AND (pregnancy [tiab] OR birth[tiab] OR clinical[tiab])。仅查询研究对象为人类的研究。标准长度的随机对照研究(RCT)和队列研究认为符合条件。对检索结果条目中的每项研究检验其与主题的相关性,仅纳入可以作为主要证据的研究。报道了人类卵母细胞或胚胎经慢速冷冻或玻璃化冷冻后的冻存率、临床妊娠率(CPR)、活产率(LBR)或分娩率的研究予以纳入引用。荟萃分析使用随机效应模型计算相对危险比(RR)和95% CI进行评价。

  结果

  本研究纳入一项比较卵母细胞慢速冷冻与玻璃化冷冻的RCT研究。该研究结果显示玻璃化冷冻组每周期、每次移植以及每颗卵母细胞的CPR均增加,统计结果分别是:每周期CPR (RR = 2.81, 95% CI: 1.05–7.51; P = 0.039; 两组分别是48及30个周期)、每次移植CPR(RR = 1.81, 95% CI 0.71–4.67; P = 0.214; 两组分别为47和19次移植)以及每卵母细胞间CPR(RR = 1.14, 95% CI: 1.02–1.28; P = 0.018; 两组分别为260 and 238个卵母细胞)。另一项纳入的RCT研究比较了经玻璃化冷冻复苏和新鲜卵母细胞的临床结局,结果显示每随机受试者、每周期及每卵母细胞间CPR均无明显差异。统计结果分别是:受试者间(RR = 1.03, 95% CI: 0.87–1.21 = 0.744, 每组300名受试者)、周期间(RR =1.01, 95% CI: 0.86–1.18; P = 0.934; 两组分别为267和259个周期)以及卵母细胞间(RR = 1.02, 95% CI: 0.82–1.26; P = 0.873; 两组分别为3286和3185个卵母细胞)。队列研究结果与RCT一致。

  检索获得7项胚胎冷冻RCT研究,其中3项符合纳入标准(复苏卵裂期胚胎及囊胚共638个周期),无原核期胚胎。尽管统计学意义甚微,但结果显示胚胎采用玻璃化冷冻的CPR高于慢速冷冻(RR = 1.89,95% CI:1.00- 3.59 = 0.051;2项RCT;I2= 71.9%)。另一项RCT研究报道了卵裂期胚胎的每周期LBR,结果显示经玻璃化冷冻的胚胎LBR较高(RR = 2.28; 95% CI: 1.17–4.44; P = 0.016; 216个周期; 1项RCT)。一项二级分析对胚胎冻存率进行了评估,汇总7项RCT研究,3615个胚胎的研究结果显示胚胎采用玻璃化冷冻技术冻存率明显高于慢速冷冻(RR = 1.59, 95% CI: 1.30–1.93; P < 0.001; I2= 93%)。

  研究意义

  基于现有RCT研究的荟萃结果表明,卵母细胞、卵裂期胚胎及囊胚经玻璃化冷冻复苏的临床结局(低级别证据)和冻存率(中级别证据)均优于慢速冻融。队列研究结果亦证实该结论。引入玻璃化冷冻技术对于辅助生殖技术优化有着重要临床意义。基于此证据,建议仍然使用慢速冷冻技术的ART实验室需考虑转变为使用玻璃化冷冻技术。

  卵母细胞慢速冷冻与玻璃化冷冻比较结果:(a)卵母细胞每周期CPR比较:RCT;(b)卵母细胞每周期CPR 比较:队列研究;(c)卵母细胞冻存率比较:RCTs

  胚胎慢速冷冻与玻璃化冷冻对比:(a)慢速冷冻和玻璃化冷冻卵裂期胚胎及囊胚的每周期CPR对比:RCTs;(b)慢速冷冻和玻璃化冷冻卵裂期胚胎及囊胚的每胚胎CPR对比:RCTs

  慢速冷冻和玻璃化冷冻卵裂期胚胎及囊胚的冻存率对比:RCTs


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